斑马论坛

注册

 

发新话题 回复该主题

斑马鱼连接蛋白C末端在皮肤斑纹形成中的作 [复制链接]

1#

摘要:

斑马鱼的身体呈现出条纹状的皮肤图案。条纹图案的形成涉及两种连接蛋白,即连接蛋白39.4(Cx39.4)和连接蛋白41.8(Cx41.8)。在此,我们研究了Cx39.4和Cx41.8的C末端(CT)结构域在体内和体外的作用。为了研究CT结构域在体内的作用,我们建立了在色素细胞中表达CT结构域修饰的连接蛋白系列的转基因斑马鱼品系,并观察到鱼的皮肤形态。为了研究CT结构域在体外的作用,我们在Neuro-2a(N2a)细胞中表达了CT结构域修饰的连接蛋白序列,并计算了斑纹的形成频率。cx39.4-/-突变体以及cx39.4和cx41.8双敲除突变体斑马鱼中缺少CT域的Cx39.4的过度表达所产生的皮肤模式类似于全长Cx39.4所产生的皮肤形态。荧光蛋白融合CT结构域修饰的Cx39.4在N2a细胞间形成缝隙连接斑纹。CT截短的Cx41.8的过表达拯救了cx41.8-/-突变体中的突变表型,但在双敲除斑马鱼中不起作用。荧光蛋白融合CT截短的Cx41.8在无Cx39.4的N2a细胞间几乎不形成斑纹,但与Cx39.4共表达时形成缝隙连接斑纹。结论至少在斑马鱼的色素细胞中,Cx39.4的CT结构域对于蛋白质功能不是必需的。但是,是否需要Cx41.8的CT域取决于Cx39.4的表达。

简介:

细胞间的相互作用是生物体发育过程中形态发生和器官发生的关键因素。为了了解细胞间相互作用的分子基础,已经积极分析了包括膜蛋白和释放因子在内的分子因素。缝隙连接(GJs)是一种介导小分子、离子、代谢物和分子量小于的第二信使在连接细胞间直接传递的细胞间通道。在脊索动物中,GJ由连接蛋白亚单位组成。六个连接蛋白齐聚成六聚体结构,称为半通道,半通道与相邻细胞的相应半通道对接形成GJ。因此,GJ由12个连接蛋白亚单位组成。连接蛋白是一种4通道跨膜蛋白;它包括几个域。N末端(NT),细胞内环(IL)和C末端(CT)域位于细胞质中,两个细胞外环(EL1和EL2)位于细胞外。许多研究表明,CT结构域在GJ功能中起着多种作用,包括通过与其他膜蛋白的相互作用将连接蛋白锚定在细胞膜上,连接蛋白定位在细胞膜上,以及在通道门控中的作用。据报道,CT结构域的突变与多种人类疾病有关。异聚体通道在交换分子、蛋白质运输和半通道/gj的电生理特性方面提供多样性。斑马鱼是一种小型热带鱼,因其在分子生物学中的应用而备受

分享 转发
TOP
发新话题 回复该主题